iPS研究方向

1．解析诱导体细胞重编程为IPS细胞的分子机制

2．研究 iPS细胞生物学特性和行为(如自我copy、增殖和分化等)调控的机制及IPS细胞体外定向诱导分化机制

3．提高iPS细胞制备效率

4．充分评价iPS细胞临床应用的安全性

5．建立有效、安全、实用制备人iPS细胞的方法，即在阐明体细胞重编程为iPS细胞机制的基础上建立无遗传修饰的IPS细胞制备策略与方法(如仅利用一些小分子物质即将人的细胞重编程为iPS细胞)

6．在前一项研究的基础上，探索一条简便制备“个体特异的”或“疾病特异的”治1疗型人iPS细胞的技术路线和方法

2006 年时，日本京都大学山中伸弥（Shinya Yamanaka） professor的团队发现只须将四个与iPS细胞特性相关的转录因子Oct3/4、Sox2、c-Myc， 以及Klf4（ 简称OSKM，也被称为「山中因子」Yamanakafactors），利用反转录病毒的方式导入小鼠皮肤纤维母细胞后，即可以促使纤维母细胞重新再编程，形成具有多能性iPS细胞的分化能力。这样的细胞， 称为「诱导式多能性iPS细胞」（iPS细胞induced pluripotent stem cells，细胞增殖检测试剂盒，iPSCs）。

细胞冻存

细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25�TA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。

加入lml冻存液（90%血1清，10%DMSO），放入冻存盒内（盒内有异丙1醇，以保证温度降低的速度），立即放入一80℃冰箱内，过夜，第二天放入液氮中，可以保存至少两年，如不放人液氮，可以保存三个月。

冻存液的配制：70%的完全培养基 20�S 10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。

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