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无细胞表达系统 武汉友名生物
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蛋白质分子伴侣(molecular chaperones)是蛋白质合成过程中形成空间结构的控制因子,广泛存在于从细菌到人的细胞中。分子伴侣新生肽链的折、加工租穿膜进大细胞器的转位过程中起关键作用。它们有些结合在多肽链上防止肽链降解或其侧链非特异聚集;有些则可引导某些肽链正确折叠并集合多条肽链成为较大的结构。

分子伴侣结合并稳定其靶蛋白质的能力具有特异性,并依赖于ATP水解。例如热激蛋白(heat shock protein)就是分子伴侣的一个家族。因加热时可在许多细胞中被诱导出来而得名。热激蛋白源于细胞内源性保护蛋白质。另外,分子伴侣还可以是核酸、磷脂、核糖体及一些小分子物质。






蛋白表达系统分类及优劣分析

原核蛋白表达系统既是zui常用的表达系统,也是经济实惠的蛋白表达系统。原核蛋白表达系统以大肠杆1菌表达系统为代表,具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点,缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制,如二硫键的形成、蛋白糖基化和正确折叠,得到具有生物活性的蛋白的几率较小。

酵母蛋白表达系统以甲1醇毕赤酵母为代表,具有表达量高,无细胞表达系统,可诱导,糖基化机制接近高等真核生物,分泌蛋白易纯化,易实现高密发酵等优点。缺点为部分蛋白产物易降解,表达量不可控。

哺乳动物细胞和昆虫细胞表达系统主要优点是蛋白翻译后加工机制比较接近体内的天然形式,相对容易保留生物活性,缺点是表达量通常较低,稳定细胞系建立技术难度大,生产成本高。


牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个,分子量为23300,活性的部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。除存在于脊椎动物外,还存在于蚕、海盘车、蝲姑、放1线菌等范围广泛的生物体中。另外与高等动物的血液凝固和炎1症等有关的凝血酶、纤溶酶、舒血管素等蛋白酶在化学结构和特异性等方面与胰蛋白酶具有密切的关系,可以认为这些酶是从共同的祖先酶在进化过程中分化而来的。胰糜蛋白酶与弹性蛋白酶在结构和催化机制方面也具有密切关系,但其特异性则完全不同。


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