腺病毒是无胞膜的线性双链DNA病毒，目前腺病毒科分为5个属，有多种型别的腺病毒已经被开发为基因转移载体，在基础科研、基因cure和载体疫1苗领域得到广泛应用。

腺病毒的基因组长约26-46kb，这使得腺病毒载体的构建与常见质粒载体(一般长度小于10kb)不同。太长的基因组使得在腺病毒载体上富集一个多克1隆位点非常困难。针对重组腺病毒的构建，开发了多种方法。

目前已有的腺病毒载体系统均存在缺陷，有些构建步骤繁琐，耗时较长，有些在重组病毒中引入了不必要的外源序列，有些不能用于重组腺病毒的反向遗传改造。近年来，新的生物特性不同的腺病毒不断被发现，因此，本领域对构建过程更加快捷简便的、人工改造更加方便灵活的腺病毒载体系统和重组病毒构建方法存在需求。

腺病毒呈无囊膜的球形结构，逆转录病毒滴度测定，其病毒粒子在感1染的细胞核内常呈晶格状排列，每个病毒颗粒包含一个36 kb的线性双链DNA，两端各有一个100~600 bp的反向末端重复序列(inverted terminal re-pea，t ITR)， ITR的内侧为病毒包装信号，是病毒包装所需要的顺式作用元件。基因组包含早期表达的与腺病毒copy相关的E1~E4基因和晚期表达的与腺病毒颗粒组装相关的L1~L5基因。

线状双股DNA与核心蛋白形成直径为60~65 nm的髓芯，被包裹于衣壳内。衣壳呈二十面体对称，由252个直径8~10 nm的壳粒组成，壳粒排列在三角形的面上，每边6个，其中240个为六邻体(非顶点壳粒) ，另12个为五邻体基底(顶点壳粒)。每个六邻体是六邻体蛋白的同源三聚体，三聚体的六邻体分子有一个三角形的塔尖和五面体的基底，塔区由4个环构成即loop1、loop2、loop3、loop4，基底包含两个区域P1、P2区[3]。六邻体上的表位(epitope)是诊断不同血1清型的标准，它包括哺乳动物腺病毒属的抗原成分，是病毒体对免1疫选择压力zui敏感的部位。

每个五邻体基底上结合着1根(哺乳动物腺病毒)或2根(禽腺病毒)长9~77. 5 nm的纤维突起，这些纤维以五邻体蛋白为基底由衣壳面伸出，纤维顶端形成头节区，纤突有血1清特异性，且含有负责体外血细胞凝集的种属特异性抗原决定位点。

PEG法

　　其基本原理是在二价阳离子（Mg2 、Ca2 等）存在的情况下，PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀，从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。

　　1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶（DHFR）突变基因（氨甲1喋呤抗性）的质粒共培养，此基因插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤组织，在不含激1素的培养基上再生长出植株。同年Omirulleh等用PEG法将外源基因导入到了HE89的原生质体中，建立了植株再生的转化体系。

　　PEG法虽然转化效率较高，但必须以裸1露的原生质体为受体，而且还受到基因型的限制。

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